Guanosina-5'-trifosfat (GTP) ialah purina nukleosida trifosfat. Ia adalah salah satu blok binaan yang diperlukan untuk sintesis RNA semasa proses transkripsi. Strukturnya adalah serupa dengan nukleosida guanosina, satu-satunya perbezaan ialah nukleotida seperti GTP mempunyai fosfat pada gula ribosanya. GTP mempunyai nukleobes guanina yang melekat pada karbon 1' ribosa dan ia mempunyai bahagian trifosfat yang melekat pada karbon 5' ribosa.Ia juga mempunyai peranan sebagai sumber tenaga atau pengaktif substrat dalam tindak balas metabolik seperti ATP, tetapi lebih khusus. Ia digunakan sebagai sumber tenaga dalam sintesis protein dan glukoneogenesis.GTP adalah penting dalam transduksi isyarat, khususnya dengan protein G dalam mekanisme penghantar kedua, di mana ia ditukar kepada guanosina difosfat (GDP) melalui tindakan GTPase.